מד"א מפעיל שבעה מוקדי 101, שבהם מתקבלות שיחות חירום ומוזנקים צוותי מד"א. מוקד מד"א מאויש על ידי פראמדיקים וחובשים בעלי ניסיון מבצעי. ניסיון זה בא לידי ביטוי בפיענוח מהיר של מצבו הרפואי של המטופל ובסיוע רפואי ראשוני באמצעות הנחיית עוברי אורח.
הניסיון המבצעי שמביאים איתם תורני המוקד מאפשר גם קריאת סיטואציה מורכבת ומתן מענה מבצעי במשולב עם הטיפול הרפואי. סקירת זירת אירוע, בטיחות המטופל והסובבים אותו, שימוש בעזרים הנמצאים בזירה ובעוברי אורח ועוד – כל אלו נבנים מניסיון מבצעי־מקצועי.
המוקד כולל חובשים או פראמדיקים המקבלים את שיחות החירום בטלפון, וכן קציני המשמרת המשגרים את הכוחות ומנהלים את הצוותים. שיחת חירום מגיעה למוקד הקרוב גאוגרפית למקום שממנו מתקשר המודיע בצד השני של הקו – כל עוד יש תורן מוקד זמין במוקד זה לקבל את השיחה. אם מקבלי השיחות במוקד תפוסים, תיענה השיחה במוקד אחר במהירות רבה.
הזמן הממוצע למענה לשיחת חירום בקו 101 הוא כ-3 שניות. תוכנת השליטה והבקרה משותפת לכלל המוקדים ועל כן אין למעשה משמעות למיקומו הגאוגרפי של מקבל השיחה. המוקד בחיפה יכול לקבל שיחות באילת, והמוקד באשדוד יכול לקבל שיחות בפתח תקווה, לדוגמה. תורן המוקד רואה את מיקום המתקשר אוטומטית על מפה ויכול לקבל גם תמונות או סרטונים מהזירה בזמן אמת.
תוכנת השליטה והבקרה של מד"א היא תוכנה ייעודית וייחודית שפותחה על ידי צוותי מד"א ומותאמת לשיטת העבודה של הארגון כארגון לאומי.
למעשה, אין חלוקת גזרות מבצעית בין הצוותים. מיקומם של כלל הצוותים, כמו גם של המגיבים הראשונים והמתנדבים, מאוכן על ידי המערכת באופן קבוע. כשמקבל השיחה נותן קוד רפואי לאירוע, המערכת מזניקה באופן אוטומטי את האמבולנס או הניידת לטיפול נמרץ הקרובה ביותר לזירת האירוע, וכן חמישה עד עשרה מגיבים ראשונים מתנדבים. למעשה, בתוך מספר שניות מרגע קבלת הקריאה כבר נשלחים הצוותים לזירת האירוע, באמצעות מערכת השיגור האוטומטית, ללא מעורבות יד אדם.
קצין המשמרת יכול להסיט אמבולנסים למשימות אחרות ולשנות את ייעודם, אך כל זאת לאחר שהצוות כבר הוזנק לאירוע על ידי אלגוריתם המחשב. קצין המשמרת יכול לבקש מתורני המוקד לחזור לפונה לצורך השלמת פרטים, לבחון שינוי במצב הרפואי ועוד.
קצין המשמרת מנהל את הצוותים ואת האירועים. חלק מתפקידו הוא לוודא שהצוותים אכן הגיבו ויצאו לאירוע, להשלים להם פרטים חיוניים בדרכם לאירוע ובמידת הצורך להזהיר אותם מפני סיכונים או אתגרים מיוחדים בזירה. באירועים רבי־נפגעים תפקידו להזניק ולהוסיף צוותים על פי הצורך, לפעול על פי רשימות תיוג לניהול אירועים חריגים, לבנות תמונת מצב, לדווח לגורמי חירום ולמוקד הארצי ולהיעזר בהם, לתת מענה לאתגרים מורכבים, להעביר מידע לבית חולים על מצב נפגעים או על היקף חריג שלהם ועוד.